Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

Содержание

Все о тесте на ВИЧ: когда делать и какой лучше?

Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

У каждого есть ВИЧ-статус, только у одних он положительный, а у других — отрицательный. Однако знать его необходимо, особенно в российских реалиях, когда в стране эпидемия, и уже более одного процента населения живет с вирусом.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека существует несколько видов тестов, причем их классификация сложна лишь на первый взгляд, на самом деле она весьма логична. Главное — помнить, что, несмотря на высокую точность анализов, ни один тест не найдет вирус сразу после заражения.

Скрининговые (поисковые) тесты

Они помогают заподозрить инфекцию, но их результаты надо подтверждать другими анализами. Для скрининга используют тесты либо на антитела, либо на антигены/антитела.

ИФА (иммуноферментый анализ).

Этот метод служит не для обнаружения самого вируса, а антител, которые наша иммунная система вырабатывает для борьбы с ним.

Делают его следующим образом: на очищенные части вируса (антигены), зафиксированные в специальной лунке, наносят кровь. Если в ней есть антитела, то образуются иммунные комплексы антиген/антитело, которые вступают в реакцию с красителем, приводя к изменению цвета. Это оценивается качественно (есть/нет реакции) и/или количественно при помощи дополнительной аппаратуры.

Существует несколько поколений ИФА:

  • В первом поколении тестов использовался сам вирус, обработанный ультразвуком, при этом определялись антитела только ВИЧ-1. Анализ обладал невысокой чувствительностью и специфичностью.
  • ИФА второго поколения научили определять антитела как к ВИЧ-1, так и к ВИЧ-2. Материалом служили синтезированные белки, аналогичные настоящим антигенам вируса. Впрочем, тесты первого и второго поколения давно не используются.
  • Следом появились тесты третьего поколения, которые позволяют диагностировать длительно текущую (хроническую) ВИЧ-инфекцию с чувствительностью и специфичностью около 100 %. Однако при острой ВИЧ-инфекции (когда антител мало или совсем нет) их точность считается недостаточной.

Современный ИФА позволяет обнаружить антитела, появляющиеся в крови с 30-го (цифры согласно клиническим рекомендациям Минздрава) дня инфицирования (по данным Центра контроля и профилактики заболеваний в США CDC — c 23 по 90 день).

За счет своей простоты и дешевизны этот метод используется чаще всего, в том числе на его основе работают экспресс-тесты.

Если такой тест оказался положительным, результат перепроверяется на тест-системе другого производителя, и в случае положительного результата применяется иммуноблот (смотри ниже).

Самое последнее поколение ИФА — четвертое. И оно уже позволяет проводить комбинированный анализ, одновременно проверяя: есть ли в крови белковые «обломки» ВИЧ (антигены), а также антитела.

Примечательно, что антиген р24 появляется в крови уже через 15 дней (по данным CDC — с 18 по 45 день) после инфицирования ВИЧ, поэтому такой вид анализа позволяет диагностировать ВИЧ-инфекцию раньше.

Так, эксперты из CDC считают комбинированные тесты наиболее предпочтительными для массового клинического использования. А российский Минздрав рекомендует его применять в качестве скринингового в большинстве лабораторий страны. Однако после получения положительного результата его также нужно перепроверять иммуноблоттингом.

Существуют два вида вируса ВИЧ — 1 и 2. В мире наиболее распространен ВИЧ-1. Разновидности вируса различаются по генетическому материалу, по-разному взаимодействуют с иммунитетом и отвечают на лечение.

Подтверждающие тесты

Как следует из названия, они позволяют наверняка убедиться в наличии или отсутствии вируса иммунодефицита у человека. Их минус в сложности и дороговизне.

Иммуноблоттинг помогает проверить результаты скрининговых анализов и уточнить, каким видом вируса инфицирован человек: ВИЧ-1, ВИЧ-2 или обоими.

Этот метод обладает высокой точностью, чувствительностью, но дорог и сложен в исполнении. Он является комбинацией ИФА и электрофореза, что позволяет определить антитела к специфическим антигенам ВИЧ-1 (gp160, gp120, gp41).

Белки под действием электрического поля располагаются в виде полосок на нитроцеллюлозной мембране.

При положительной реакции антиген/антитело на полосках становится видно потемнение.

ПЦР (полимеразная цепная реакция). Тест способен находить генетический материал ВИЧ (ДНК/РНК), то есть проверяет, есть ли непосредственно вирус в крови. Нуклеиновые кислоты могут обнаруживаться уже на 7-й день после инфицирования (по данным CDC — c 10 по 33 день).

При этом методе в пробирке с помощью различных ферментов многократно дублируется участок ДНК или РНК вируса до таких объемов, что его можно увидеть глазом в виде полосок. Кроме того, ПЦР бывает качественным и количественным. В последнем случае можно отслеживать вирусную нагрузку (концентрацию вируса в крови и других биологических жидкостях) у людей с ВИЧ, оценивая эффект терапии.

А я могу сдать сразу иммуноблот или ПЦР, чтобы узнать свой ВИЧ-статус?

Иммуноблот используют специальные лаборатории центров по борьбе со СПИДом. Пробы крови направляются туда для перепроверки уже положительных первичных скрининговых анализов. Сразу сдать его не получится, даже в платных клиниках.

ПЦР, наоборот, можно сдать в любой момент, но только обратившись в коммерческую лабораторию. В СПИД-центрах его делают также для перепроверки ранее положительного теста. Да, ПЦР позволяет максимально быстро (в течение 7—10 дней после инфицирования) обнаружить ВИЧ, но и у него есть недостатки:

  • высокая стоимость;
  • может обнаружить только ВИЧ-1;
  • в редких случаях выявление низких уровней РНК ВИЧ (например, 99 % чувствительности и специфичности), но все равно чуть ниже лабораторных анализов.Сегодня среди них наиболее популярны тесты слюны (или околодесневой жидкости) и крови. Их можно либо купить самому, либо получить бесплатно в ВИЧ-сервисных организациях.Если вы сделали экспресс-тест и он оказался положительным, необходимо его перепроверить более точным методом.Где я могу сделать тест на ВИЧ анонимно и бесплатно?Можно пойти в местный СПИД-центр, кабинеты анонимного консультирования или в некоммерческие организации (например, фонд «СПИД.ЦЕНТР»). Анализ на ВИЧ бесплатный и анонимный, прикрепление к поликлинике и регистрация не требуются. После сдачи теста выдается идентификационный номер, по которому можно будет узнать результат.

Источник: https://spid.center/ru/articles/2385/

Анализ ПЦР на ВИЧ достоверность и через сколько можно сдавать?

Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

Существуют различные способы обнаружить вирус иммунодефицита, именно анализ на ВИЧ ПЦР методом заслуживает особого внимания. Он основывается на том, что находит генетический материал возбудителя. Это исключает ошибку практически гарантированно. Исторически методика планировалась как чисто научный способ, но нашла применение.

ПЦР через сколько можно сдать на ВИЧ при подозрении на заражение? Отличие как раз и заключается в оперативности, потому прописать такой анализ могут на самых ранних стадиях развития болезни.

Если потенциальный больной пришел к врачу сразу же после возможного инфицирования и признаков жизнедеятельности вируса еще нет, то будет назначен именно ПЦР анализ. Он работает уже с четвертого дня присутствия вирионов в крови.

Для точности рекомендуется анализ примерно на 14-й день после опасного взаимодействия.

Какова достоверность ПЦР на ВИЧ через 2 недели? Как установлено, достоверность определения наличия вируса методом полимеразно-цепной реакции очень не вызывает сомнений. С 80-х годов прошлого столетия именно этот тест массово применяется и считается одним из точнейших, его разработчик получил Нобелевскую премию. Лауреат предвидел перспективность полимеризации уже в ту эпоху.

Происхождение анализа методом ПЦР

Датой рождения можно назвать 1983 год. Метод основан на том, чтобы вычленить фрагмент нуклеотидной цепи чужака, это может быть как рибонуклеиновая кислота так и дезоксирибонулеиновая, искусственно размножить его и исследовать.

Специалист по ПЦР ДНК ВИЧ берет и размножает по принципу комплементарности, выстраивая довольно длинную цепочку, которую удобно рассмотреть и подвергнуть тестированию.

ПЦР РНК ВИЧ осуществляется так же, только берется плазма или сыворотка.

Возникновение этого подхода в широкой практике явилось настоящим прорывом и позволило совершить большой шаг в вопросе помощи больным. Таким образом стало реальным помогать людям на самых ранних этапах, обнаруживать недуг еще до появления специфичных антител. С этого дня истории медицины, ВИЧ уже не является приговором.

Диагностика ВИЧ ПЦР

Для исследования методом полимеразно-цепных реакций надо взять совсем немного инфекционного материала, потому поставить диагноз можно быстро и безотлагательно.

Диагностика ВИЧ ПЦР точна, требует виртуозного уровня квалификации от работников, которые занимаются исследованием. Современные лабораторные помещения много раз проверяют данные, которые получают, прежде чем сообщить итог обратившемуся.

Диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом занимает один день или несколько, все зависит от загруженности персонала.

Есть некоторые желательные условия к сдающему анализ, чтобы получить максимально правдивый ответ:

  • Не есть 8-10 часов, если к этому нет противопоказаний;
  • За пару дней отказаться от алкоголя;
  • Сутки до не практиковать спортивных упражнений.

Это все, что должен сделать испытуемый. Остальное – дело медработников. Стерильность в помещении должна быть 100%, референц-лаборатории ведущих центров регулярно проверяются на предмет чистоты и исправности стерилизаторов. ПЦР применяют и для того чтобы удостовериться в диагнозе, и для подсчета вирусных частиц в крови, то есть вирусной нагрузки.

Через сколько можно сдать анализ ПЦР на ВИЧ?

Многие все же не доверяют результатам, которые получаются в первые дни после контакта с возбудителем. Анализ на ВИЧ ПЦР через какое время считается самым оптимальным? Чем больше времени проходит с момента попадания вируса в тело, тем проще его выявить.

Но не следует забывать, что и лечить больного со временем все сложнее. Если достоверно известно, что был контакт с больным человеком, то не следует тянуть больше 14 дней.

Если нет информации о контактах с положительными на ВИЧ людьми, то анализ нужно сдать сразу при появлении первых симптомов.

ПЦР ВИЧ на 9 неделе имеет высокую точность, но на этом сроке могут предложить и другое исследование, ИФА. Этот альтернативный анализ более дешевый, также точный, но основан на исследовании антител, которые, к сожалению, появляются не сразу после инфицирования. В идеале, для подтверждения диагноза, проводят оба анализа, сроки устанавливает врач.

Качественный ПЦР на ВИЧ дает понимание, действительно ли вирус иммунодефицита присутствует в организме. Этим же методом можно определить и другие инфекции.

Как проходит анализ на ВИЧ методом ПЦР?

Анализ на ВИЧ методом ПЦР процедура не сложная и начинается с забора венозной крови у пациента. Исследовать могут как ДНК, так и РНК, но сама процедура взятия материала будет одинаковой.

С помощью специальных реагентов, праймеров, в стерильной лаборатории проводится анализ.

За единицу времени количество копий вырастает до определенных значений, эти значения оценивает сотрудник лаборатории.

Проводится также определение возбудителя, чтобы установить, что речь идет о том самом вирусе. Таким образом, метод дает возможность качественного и количественного исследования биоматериала.

При каких условиях диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом обязательна?

Так как анализ не из дешевых, его проводят не всем и не всегда. Правда, есть ряд случаев, когда он обязателен. Донорам, к примеру, обязательно нужно сдать анализ на ВИЧ ПЦР. Также анализ проводят в случае непредвиденных аварий в медицинских учреждениях и лабораториях, и при этом есть риск контактов здоровых людей с кровью инфицированных.

В большинстве случаев исследование проводится на добровольных началах. Обязать могут только медицинских работников и, иногда, педагогов и других работников сферы образования, которые контактируют с маленькими детьми. Также основанием для принудительного обследования могут послужить признаки резкого снижения иммунитета.

Результаты анализа ПЦР на ВИЧ их точность и достоверность

Тест ПЦР на ВИЧ достоверность показывает очень высокую, до 99%. Следует напомнить, что точность зависит и от срока. На пятый день после проникновения вируса в тело, точность составляет примерно 80%. Уже к 14 дню этот показатель повышается до 98%. Далее доходит до 99%.

Практика показывает, что ложноотрицательных результатов практически не бывает, порой случаются ложноположительные. ПЦР на ВИЧ точность 99% дает вполне хорошее представление о состоянии здоровья человека, контактировавшего с ВИЧ-позитивными людьми.

Анализ ПЦР ВИЧ на раннем этапе дает шанс оперативно среагировать на проблему, и своевременно принять меры по продлению активной жизни. Провериться будет не лишним, если есть риск заражения.

Пцр на вич отрицательный, что это значит?

пцр на вич отрицательный, как уже было сказано выше, практически не может быть ложным. в таких ситуациях врач ставит диагноз «здоров» и дальнейшее обследование не показано, если, конечно, ос временем не появится клинических симптомов заболевания.

что делать при положительном результате анализа пцр при вич?

ситуация совсем иная, когда пцр тест на вич дал положительный результат. в этом случае можно рассчитывать на ошибку, но, чтобы подтвердить эту гипотезу, необходимо продолжить обследование. повторный тест и дальнейшее исследование другими методами провести нужно обязательно, и врач обязательно назначит анализы. игнорировать требования врача нельзя.

пцр при вич проводится на ранних стадиях, а также иногда назначается при прохождении пациентом антиретровирусной терапии.

перспективы теста пцр

Метод ПЦР в диагностической медицине можно считать перспективным, действенным и точным. Пока что единственным его минусом можно считать высокую стоимость.

Исследование генетического материала вирусной частицы дает возможность с высокой точностью подтвердить или опровергнуть наличие инфекции, а также предсказать скорость развития заболевания.

ДНК тест на ВИЧ, или же РНК анализ, дает точность до 99%, причем на самых ранних этапах. Раннее диагностирование ВИЧ дает огромные шансы на успешную терапию.

Результат оценивают после 14 дней с предполагаемого момента проникновения вируса, предположительно это может незащищенный половой контакт или инъекции иглой сомнительной чистоты. Отрицательный результат при анализе ПЦР можно считать достоверным, в то время как положительный подлежит дополнительной проверке.

*Если вам не повезло и анализ ПЦР на ВИЧ показывает положительный результат, не стоит отчаиваться. В настоящее время существует целый список эффективных антиретровирусных препаратов, которые способны замедлить развитие болезни и продлить жизнь на 30-40 лет.

Источник: https://medinfo.club/analiz-ptsr-na-vich/

Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точность

Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

ПЦР – основной метод контроля течения ВИЧ-инфекции. Иногда его используют для первичной диагностики этого заболевания.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Не вдаваясь в сложные технические детали исследования, сутьего можно описать следующим образом:

1. У вируса есть генетический материал. Он закодирован в РНК(рибонуклеиновой кислоте) с помощью нуклеотидов (молекул четырех видов, которыерасполагаются в разной последовательности).

2. Ученые владеют информацией о некоторых участках РНК, знаюнуклеотидную последовательность.

3. В ходе ПЦР проводится многократное удвоение вирусной РНКи сравнение её с эталоном (известной последовательностью нуклеотидов).

Таким образом, исследование позволяет определить, есть ли вкрови пациента специфические – уникальные только для вируса иммунодефицита –фрагменты РНК. Определяется не только факт их наличия, но и количество –концентрация копий РНК в 1 мл крови. Эта информация важна для планированиялечения и оценки эффективности терапии.

Кому проводится ПЦР?

Основные области применения ПЦР:

1. Тестированиедонорской крови на ВИЧ. Её проверяют и с помощью серологических тестов. Ноте могут дать ложноотрицательный результат, если инфицирование произошлонедавно. Поэтому кровь дополнительно обследуется методом ПЦР для выявлениявирусной РНК – самого раннего маркера инфекции.

2. Первичнаядиагностика ВИЧ у новорожденных. Обычно для первичной диагностикиВИЧ-инфекции используют серологические тесты.

Но в случае обследованияноворожденных они не будут эффективными. Раз пациенту назначены анализы, этоозначает, что он родился от ВИЧ-инфицированной матери. В её крови есть антителак вирусу иммунодефицита.

Это означает, что они будут обнаруживаться и в кровиребенка.

Таким образом, при обследовании всех детей, рожденных отВИЧ-позитивных матерей, будут получены положительные результаты ИФА. Но это неозначает, что передача инфекции произошла. Ведь организм ребенка вполне может ине продуцировать собственных антител.

Диагноз можно подтвердить и с помощью серологическихметодов. О ВИЧ-инфекции говорит более высокая концентрация антител в кровиребенка, чем у матери, а также возрастание титра в динамике (если этоматеринские антитела, то их уровень должен со временем снижаться, а неувеличиваться).

В качестве альтернативного теста используется ПЦР.Обнаружение вирусной РНК тоже считается подтверждением присутствия вирусаиммунодефицита.

Специфичность теста составляет 99% (риск ложноположительногорезультата не превышает 1%). Но чувствительность ниже – около 96%.

Поэтомутребуется два исследования: первое проводится через месяц после родов, а второе– через 3 месяца (в этом возрасте чувствительность ПЦР достигает 100%).

Даже при двух отрицательных результатах ПЦР, нужно подтвердитьисчезновение из крови материнских антител при помощи ИФА. Поэтому анализысдаются в возрасте 1 год. Если положительная реакция сохраняется, то контрольпроводится в полтора года.

3. Слабоположительнаяреакция. ИФА на ВИЧ является скрининговым тестом. Его результатыподтверждаются при помощи иммуноблота. Но это исследование иногда даетсомнительные результаты.

В таких ситуациях стандартный алгоритм диагностикипредполагает дополнительное тестирование таких пациентов через несколькомесяцев.

Но бывает, что результаты снова оказываются сомнительными илислабоположительными.

Самой частой причиной сомнительных результатов являетсянедавнее инфицирование пациента. Но он также может быть следствием другойинфекции. Чтобы точно узнать, имеется ли у человека ВИЧ, можно выполнить ПЦР.Этот метод покажет точный результат уже после первого случая полученияслабоположительной реакции.

4. Острыйретровирусный синдром. В большинстве случаев по своим клиническимпроявлениям ничем не отличается от гриппа или инфекционного мононуклеоза.Большинство пациентов проходят под диагнозом ОРВИ. Но внимательный врач можетобратить внимание на длительную лихорадку, тяжелое течение инфекции, отсутствиенасморка и увеличение сразу нескольких групп лимфоузлов.

Ретровирусный синдром начинается спустя месяц послезаражения. В этот период антител в крови ещё может не быть. Но ПЦР ужестановится положительной. Поэтому именно этот способ диагностики применяют,если есть подозрение, что больной мог заразиться совсем недавно.

5. Противоречивые результатыосновных тестов. Основными тестами является ИФА и иммуноблот. Иногда онипроводятся одновременно, иногда – последовательно.

Положительная реакция ИФАстановится поводом для проведения иммуноблота. Это подтверждающий тест. Если онположительный, ставится диагноз ВИЧ. Но бывает, что подтверждающий тестоказывается отрицательным.

Причин тому может быть две:

  • ложноположительный результат ИФА (бывает в 3-4%случаев);
  • ложноотрицательный результат иммуноблота (обычнов ранний период после заражения).

Разрешить противоречие помогает ПЦР. При отрицательномрезультате ВИЧ исключают, а при положительном – подтверждают. В случаеполучения отрицательного результата желательно повторно сдать анализы через 3месяца, чтобы на 100% удостовериться в отсутствии ВИЧ.

6. Определениепоказаний к экстренной профилактике ВИЧ у медработника. Профилактикаантиретровирусными препаратами показана, только если медработник повредил своюкожу инфицированным материалом.

Иногда неизвестно, инфицирован ли человек, скровью которого произошел контакт.

В таком случае для его обследования лучшепровести ПЦР, чем серологические тесты, так как они дают ложные положительныерезультаты на раннем этапе развития заболевания.

Изредка необходимость в ПЦР возникает, если нужно отличитьВИЧ 1 и 2 типа. Второй тип встречается редко – у 1 из 200 инфицированных.Обычно иммуноблот позволяет провести дифференциальную диагностику. Но иногданаблюдаются случаи перекрестной реактивности, когда антитела к ВИЧ-1взаимодействуют с антигенами ВИЧ-2. Более точным тестом, позволяющим точноопределить тип вируса, является ПЦР.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Большинство производителей тест-систем указывают, что ПЦРможет использоваться в качестве метода первичной диагностики ВИЧ. Однако вдействительности в большинстве стран, в том числе в России, анализ на вируснуюРНК не используют для этой цели, предпочитая ему серологические исследования.Это связано с некоторыми недостатками диагностического метода:

1. Большинство тестов, использующихся в рутинной врачебнойпрактике, определяют только ВИЧ 1 типа. Но существует также ВИЧ 2 типа,вызывающий около 0,5% случаев заболевания.

2. Риск ложноотрицательного результата. Вирус быстромутирует. Его генетический материал постоянно меняется. Поэтому участок РНК, напоиск которого направлена ПЦР, может оказаться измененным.

Проблема решаетсяпутем проведения ПЦР с двойной мишенью. В этом случае реакция направлена напоиск сразу двух специфических фрагментов РНК. Вероятность, что оба ониокажутся измененными в результате мутации, чрезвычайно мала.

Но такоеисследование стоит дороже.

3. Не выявляется ВИЧ у элитных контроллеров. Это группалюдей – около 1% — организм которых способен сдерживать развитие вируса безпомощи лекарств. У них не развивается синдром иммунодефицита. Вирусная нагрузкаочень маленькая, поэтому ПЦР дает отрицательный результат.

Но антитела в кровиопределяются, поэтому серологические тесты более эффективны. Существуют такжелюди с временным контролем ВИЧ-инфекции. У них способность контролировать вирусвыражена слабее. Но на некоторое время достигается полное его подавление.

Иесли в этот промежуток времени провести ПЦР, она покажет отрицательныйрезультат.

4. Низкая эффективность после экстренной профилактики. Еёвыполняют после того как состоялось действие, которое могло послужить факторомпередачи инфекции. Например, это может быть:

  • ребенок, которого ВИЧ-инфицированная матьпокормила грудным молоком;
  • взрослый, вступивший в половую связь сВИЧ-инфицированным человеком;
  • медработник, уколовшийся зараженной иглой.

Но имеются и плюсы. ПЦР редко дает ложноположительныерезультаты. Кроме того, метод определяет количество вирусов в крови, что важнодля выбора лечебной тактики.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать?

Большинство лабораторий выдают результаты через 2 дняи более с момента взятия биоматериала. Сдать анализ ПЦР на ВИЧ в Москве подоступной цене вы можете в нашем медицинском центре.

Источник: https://ticf.org/novosti/analiz-na-vich-s-pomoshhyu-metoda-ptsr-kogda-sdavat-kakaya-tochnost/

Вирусные инфекции. 2 часть

Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

  • Антитела HLA.
  • Наличие антител к другим ретровирусам человека (например, ВИЧ-2).
  • Неправильно распознанная перекрестная реакция с другими белками невирусной природы у здо­ровых.
  • Болезни соединительной ткани.
  • Поликлональные гаммапатии.
  • Гипербилирубинемия.
  • У доноров крови с низким риском в 4,8% раза меньше, чем при РНК-ПЦР.
  • Свежая ВИЧ-инфекция; тест обычно становится положительным в сроки от 6 недель до 6 меся­цев.
  • Больные СПИДом с развернутым прогрессирующим иммунодефицитом, поскольку выработка антител уже прекращается.
  • Вирус имунодефицита обезьян (ВИО) в < 2% случаев.

Принцип действия полимеразной цепной реакции достаточно сложный. Это метод молекулярной генетики, позволяющий анализировать любую короткую последовательность ДНК или РНК.

Это можно осуществлять даже в образцах биологического материала, содержащих минимальное количество искомых патогенных возбудителей. Более простым языком ПЦР при ВИЧ можно объяснить так:

  • каждый вирус, в том числе и вирус иммунодефицита, содержит геном, закодированный в ДНК или РНК определенным набором нуклеотидов, которые образуют две параллельные спиралевидные цепи, соединённые между собой;
  • в ходе многочисленных исследований учёным удалось выделить и воспроизвести участок РНК вируса иммунодефицита человека;
  • во время проведения ПЦР происходит многоразовое копирование генома материала при температуре реагента 94 градуса Цельсия, после чего полученную РНК сравнивают с эталонной РНК вируса.

По окончании анализа амплификатор выдаёт результат – отрицательный, то есть геном вируса иммунодефицита в исследуемом материале отсутствует, или положительный, когда выявлена частица РНК вируса ВИЧ.

ПЦР является одновременно и качественным, и количественным анализом крови, поскольку определяет наличие вируса и его концентрацию, что важно для мониторинга антиретровирусной терапии.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР диагностика на ВИЧ расшифровывается как полимеразная цепная реакция. Для исследования данного вида применяются различные типы биологических материалов. Среди них кровь, кроме этого может использоваться секреция из влагалища пациентки или семенная жидкость у мужчин.

Внимание! Слюна для ПЦР при диагностике ВИЧ не используется. Подобный подход признан неэффективным, поскольку в этом материале антитела к ВИЧ находятся в минимальной концентрации. Это же касается мочи, пота и слез.

Показанием к проведению описываемого исследования, является дважды положительный ИФА (иммуноферментный анализ). Об альтернативных назначениях речь пойдет позже.

Кому и в каких случаях проводится диагностика

Полимеразная цепная реакция не принадлежит к скрининговым методам диагностики болезни, а используется для подтверждения диагноза у лиц с подозрением на инфицирование. Тестирование показано в следующих ситуациях.

  • Положительная или слабоположительная реакция анализа ИФА. Выявление антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа – это скрининговый метод диагностики ВИЧ, который проводят лицам из групп риска, а также всем желающим определить свой ВИЧ-статус. Все положительные и слабоположительные ИФА-тесты проходят повторную диагностику путём ПЦР.
  • Неоднозначная интерпретация скрининговых тестов на ВИЧ. Для скрининга используют ИФА, после чего материал дообследуют методом иммуноблотинга. Ситуация, когда результаты этих тестов различаются, требует проведения ПЦР.
  • Исследование крови от доноров с целью профилактики распространения ВИЧ. Гемоматериал проверяют одновременно методами ИФА и ПЦР, поскольку при недавнем заражении антитела к вирусу иммунодефицита могут ещё не сформироваться.
  • Тестирование крови новорождённых от матерей, больных СПИДом. Поскольку у женщин с положительным ВИЧ-статусом в крови циркулируют антитела против возбудителя, то и у новорождённого также будут обнаруживаться эти иммуноглобулины. Тест ИФА будет положительным всегда, но это не будет говорить о том, что ребёнок инфицированный. Поэтому всем детям, которые были рождены от матерей, больных СПИДом, проводят ПЦР. Достоверность исследования составляет 99 %. Учитывая риск ложноотрицательного результата, первую ПЦР выполняют ребёнку в возрасте один месяц, а вторую – в четыре месяца. Но даже при двух отрицательных тестах на ВИЧ обязательно проводят ИФА в 12 месяцев, чтобы удостовериться в том, что иммуноглобулины матери исчезли из кровяного русла. Если ИФА в год положительная, то контрольное исследование делают через 6 месяцев.
  • Острый период ВИЧ-инфекции. В этом периоде заболевание маскируется под ОРВИ и моноцитарную ангину, но симптомы беспокоят пациента на протяжении нескольких недель. Признаками, которые также должны насторожить, являются отсутствие ринита и лимфаденопатия нескольких групп лимфатических коллекторов. Симптомы появляются через 3-4 недели после заражения, и антитела к патогену ещё не успевают синтезироваться, поэтому используют метод ПЦР, чтобы идентифицировать РНК ВИЧ.
  • Факт контакта медработника с биологическим материалом пациента с ВИЧ. В данном случае показана химиопрофилактика антиретровирусными препаратами, поэтому необходимо определить сразу после контакта, произошло ли инфицирование медработника или нет.
  • Дифференциальная диагностика ВИЧ 1-го и 2-го типов. ВИЧ 1-го типа более агрессивен и быстрее распространяется, поэтому пациентам с положительным ВИЧ-статусом назначают тест ПЦР с целью идентификации типа возбудителя. Хотя у многих больных одновременно обнаруживают оба типа патогена.

Независимо от ситуации, ПЦР назначается врачом-инфекционистом. Также можно пройти тестирование в частной клинике по собственному желанию, причём анонимно.

Кому назначается?

В первую очередь, ПЦР назначается при подозрении на ВИЧ. Методика также может быть показательной для выявления заболеваний, передаваемых половым путем, наследственных заболеваний.

Справка! ПЦР-диагностика часто проводится по инициативе человека, у которого не проявились симптомы заболевания, однако есть предположение и беспокойство о возможном заражении, например, после незащищенного полового акта, недавнего переливания крови, контакта с зараженным человеком.

Кому еще показано проведение обследования?

  • Людям, у которых анализ ИФА дважды оказался положительным. ПЦР позволит установить окончательный диагноз.
  • Донорам, планирующим сдать кровь.
  • Людям, у которых иммуноблоттинг подтвердил диагноз. Иммунный блоттинг — метод диагностики СПИДа, и обычно его проводят совместно с ПЦР.
  • Людям, находящимся на этапе лечения заболеваний, вызванных ВИЧ. ПЦР позволяет оценить эффективность терапии.
  • Новорожденным, мать которых ВИЧ-положительна (передача вируса происходит примерно в 30% случаев). Уже через 2-3 недели после рождения можно определить, произошло ли заражение.

Как сдаётся анализ

Для диагностики на ВИЧ/СПИД методом ПЦР используют венозную кровь. Тестирование проводят как в государственном учреждении, которое принято называть СПИД-центром, так и частных клиниках.

Если вы подозреваете, что могли заразиться вирусом иммунодефицита человека, то можете пройти диагностику методом ПЦР. Для этого необходимо обратиться в областной СПИД-центр, где исследование будет бесплатным. В частной лаборатории тестирование платное, но результаты будут готовы быстрее.

На забор крови нужно прийти с документами, удостоверяющими личность (паспорт, свидетельство о рождении и тому подобные).

Подготовка пациента

ПЦР-диагностика при ВИЧ не требует какой-либо специальной подготовки. Необходимо только прийти в лабораторию натощак, за два дня до забора материала ограничить физические нагрузки, отказаться от спиртных напитков и не курить за два часа до исследования.

За две недели до тестирования нужно прекратить приём медицинских препаратов, если же это невозможно, то следует предупредить о ситуации врача-лаборанта, который будет интерпретировать результаты ПЦР.

Взятие материала

Забор крови проводят из вены, расположенной в локтевой ямке, с помощью специальной вакуумной стерильной пробирки с иглой. Процедура состоит из следующих этапов:

  • медицинская сестра обрабатывает кожу внутренней поверхности локтевого изгиба 96-процентным этанолом;
  • на среднюю треть плеча накладывают жгут;
  • иглу вводят в вену, и когда начинает поступать кровь, ослабляют жгут;
  • для ПЦР набирают 3-5 мл крови;
  • после забора материала к месту инъекции прикладывают ватный тампон, просят согнуть руку в локтевом суставе.

После процедуры пациенту присваивается номер, пробирка направляется в лабораторию для проведения ПЦР.

Расшифровка результатов

Интерпретация анализов ПЦР проводится непосредственно в лаборатории врачом лабораторной диагностики. Результат выдаётся лично пациенту при предъявлении документов, подтверждающих его личность.

Сколько времени делается анализ

Тестирование крови на ВИЧ с помощью полимеразной цепной реакции длится около шести часов. Результат в государственных лабораториях можно ждать от трёх дней до одной недели, а в частных лабораторных центрах – на 2-й…3-й дни после забора крови.

В некоторых лабораториях можно узнать расшифровку теста в день забора крови, но для этого необходимо доплатить за срочность.

Показатели качественного анализа

Результат качественного ПЦР позволяет определять присутствие или отсутствие в организме вируса иммунодефицита человека. Но оценить вирусную нагрузку с помощью этого теста нельзя. Поэтому качественный ПЦР подходит только для верификации диагноза ВИЧ, но не для мониторинга антиретровирусной терапии.

В заключении тестирования на ВИЧ качественным методом ПЦР можно увидеть три варианта результатов.

  1. Отрицательный – РНК возбудителя не обнаружено.
  2. Положительный – обнаружено геном ВИЧ.
  3. Концентрация РНК ниже порога чувствительности тест-системы.

Количественное исследование

С помощью количественной полимеразной цепной реакции удаётся определить вирусную нагрузку, то есть концентрацию ВИЧ в крови больного. Показанием к проведению данного вида исследования являются:

  • оценка тяжести патологического процесса в организме;
  • мониторинг противовирусного лечения;
  • определение эффективности терапии.

Результаты количественного ПЦР могут быть следующими:

  • 0, то есть РНК вируса в крови пациента не выявлено;
  • 10 тысяч копий на миллилитр – низкая вирусная нагрузка;
  • 20 тысяч копий на миллилитр – показана антиретровирусная терапия;
  • больше 100 тысяч копий на миллилитр – высокий уровень вирусной нагрузки.

Генотипирование

Метод генотипирования ПЦР определяет, каким именно типом ВИЧ произошло инфицирование. Вирус иммунодефицита первого и второго типов имеют схожую клиническую картину, но первый тип ВИЧ более агрессивен, быстро прогрессирует и вызывает осложнения.

Может ли результат быть ложноположительным

Как и любое другое исследование, анализ крови на ВИЧ методом ПЦР может давать ложноположительные результаты. Погрешность тестирования составляет 1-2 %, в зависимости от тест-системы. Специалисты это объясняют порогом чувствительности оборудования для проведения полимеразной цепной реакции.

Могут также определяться положительные ошибочные результаты ПЦР, вызванные нарушением техники забора крови, неправильностью проведения тестирования, загрязнением материала заражённой ВИЧ кровью и некачественными тест-системами.

Чтобы избежать лишних стрессов из-за ложноположительного ПЦР, нужно основательно подойти к выбору лаборатории для проведения тестирования – изучить отзывы о клинике, проверить сертификаты на исследование, удостовериться в квалификации медицинского персонала и так далее.

Через сколько времени после заражения можно обнаружить ВИЧ

Чтобы результат ПЦР был максимально точным, тестирование проходят через 14 дней после возможного заражения, поскольку это время необходимо для увеличения концентрации вируса в организме до порога чувствительности тест-системы. Специалисты рекомендуют также пройти повторную диагностику через месяц после первого анализа. Если не соблюдать сроки, то можно получить ложноотрицательный результат.

Источник: https://MedikTest.ru/analizy/tochnost-analiza-pcr-na-vich.html

Сколько времени делается ПЦР анализ на ВИЧ?

Сколько по времени делаются анализы на пцр вич

Вирус иммунодефицита человека никак не проявляет себя на протяжении от двух до 15 лет. Вирус атакует иммунную систему, снижая защиту организма от болезней. Симптомы иммунодефицита проявляются только в стадии СПИДа. Найти возбудителя в крови на ранних стадиях позволяет анализ на ВИЧ.

Исследования проводятся во всех государственных медицинских учреждениях, многих коммерческих центрах. Люди группы риска регулярно проходят диагностику, другим исследуют сывороточные пробы при подозрении на заражение.

РНК-вирус из группы ретровирусов встраивается в хозяйские молекулы ДНК. Возбудитель распространяется несколькими путями: гематогенным, половым, вертикальным. Своевременное выявление вирусоносителей препятствует массовому заражению.

Выявление вируса иммунодефицита

На тестовое исследование пациенты традиционно сдают венозную кровь для анализа на ВИЧ и СПИД. Первичная диагностика заболевания заключается в определении антител к 1 и 2 типу вируса, антигена p24. По статистике порядка 15% больных СПИДом являются вирусоносителями гепатита С, В.

Анализ на anti-HIV1, 2/Ag p24, антитела при подозрении на инфицирование проводится совместно с тестом на гепатиты. Методы молекулярной диагностики вируса ВИЧ отличаются высокой точностью. Когда тест положительный, обязательно проводится повторное исследование сыворотки для подтверждения или опровержения первичного результата.

Какой анализ позволяет выявить вирус иммунодефицита в организме?

Тесты сыворотки определяют:

  • РНК-вирус иммунодефицита;
  • ДНК-геном вируса;
  • антитела 1 и 2 типа.

Методом иммуноферментного исследования выявляется антиген Р24. ПЦР-анализом на ВИЧ возбудитель выявляется на ранних стадиях, через две недели после заражения. По общему анализу крови при ВИЧ судят о состоянии здоровья пациента, присутствие вируса по результатам не установить.

Что сдают для анализа на ВИЧ?

В опасной концентрации вирус присутствует в половом секрете, грудном молоке, кровяной сыворотке, раневом экссудате. Лабораторными методами выявить возбудитель можно в любых биологических жидкостях:

  • моче;
  • испражнениях;
  • соскобах;
  • слюне;
  • тканях, извлеченных при биопсии;
  • спинномозговой жидкости;
  • плевральных скоплениях.

Когда врач назначает анализ крови на ВИЧ или СПИД?

Тест делается пациентам с:

  • половыми инфекциями;
  • гепатитами, им каждые три месяца необходимо сдавать анализы на ВИЧ и гепатиты В, С.

В обязательном порядке обследуются:

  • медицинские работники;
  • доноры крови, биологического семенного материала (яйцеклеток, спермы);
  • беременные женщины;
  • поступающие на стационарное лечение больные;
  • призывники в ряды вооруженных сил.

Обследование рекомендовано:

  • инъекционным наркоманам;
  • лицам, имеющим контакт с инфицированными;
  • людям, подвергшимся половому насилию
  • после случая повышенного риска заражения.

Принцип действия диагностических тестов

По общему анализу крови при ВИЧ судят о развитии иммунодефицита. Повышение уровня лейкоцитов и лимфоцитов характерно на начальных стадиях. Затем развивается лимфопения – организм уже не сопротивляется возбудителю. Снижается уровень гемоглобина, развивается анемия.

Кровь хуже сворачивается из-за снижения количества тромбоцитов. Еще один показатель – нейтрофилы, они продуцируются костным мозгом. Их тоже становится меньше. Через 12-14 дней после заражения концентрация вируса достигает уровня чувствительности прибора.

ПЦР-исследование крови на ДНК выявляет молекулу провируса, определяет вирусную нагрузку. ИФА методом, комбинированными тестами обнаруживают антитела к вирусу, антиген р24. Они появляются в сыворотке крови через две недели после инфицирования. Затем их концентрация растет до месяца. Потом их уровень остается неизменным на протяжении многих лет.

Подготовка к исследованию

В течение 4-х дней перед сдачей анализа крови на ВИЧ и гепатиты В, С необходимо разгрузить организм:

  • снизить пищевую и медикаментозную нагрузку;
  • отказаться от алкоголя;
  • убрать из рациона вредные продукты с химическими добавками, канцерогенами;
  • воздержаться от половых контактов.

Для сдачи анализа на ВИЧ необходим пустой желудок, тогда снижается риск ложных результатов.

Сроки выполнения анализа

Для получения результата экспресс-анализа на ВИЧ необходимо меньше суток, срочное исследование крови в центрах проводится в течение двух часов. Для проведения иммуноблота (двойного исследования ИФА) требуется от трех до 10 дней. Такие исследования проводятся в референс-лабораториях или СПИД-центрах.

Если проводят полимеразную цепную реакцию на определение иммунных окончаний, для получения нужного числа копий требуется до трех дней. Сколько будет делаться анализ на ВИЧ, зависит от удаленности от лаборатории. С учетом хранения, транспортировки биоматериала срок исполнения может затянуться до 10 рабочих дней.

Стоимость обследования

Расценки на тестирование указываются в прайсах клиник. Стоимость зависит от сложности теста, вида диагностического оборудования (от 350 рублей стоит иммуноблот, от 700рублей – ИФА, до 9 тысяч – количественный ПЦР).

Государственные учреждения проводят диагностику бесплатно. Но сдать кровь анонимно в этом случае не получится. Необходимо предъявить паспорт или другое удостоверение личности, миграционную карту.

Анонимное обследование на ВИЧ

Если возникли подозрения на заражение, сначала необходимо оценить общее состояние. Отклонения в общем анализе крови при ВИЧ – повод пройти дополнительное тестирование. Настораживает снижение уровень лейкоцитов, тромбоцитов, других показателей.

Анонимные анализы на ВИЧ проводятся в специализированных центрах. При необходимости для забора крови специалисты выезжают на дом. Пациенту присваивается регистрационный номер. Для граждан предусмотрено бесплатное обследование на ВИЧ анонимно в центрах СПИДа, приезжим придется платить. Экспресс-тесты проводят многие частные клиники.

Результаты анализа

Трактуются экспресс-анализы на ВИЧ по четырем показателям: положительный, отрицательный, ложноположительный, ложноотрицательный. Методом блоттинга определяются гликопротеины gp160, gp120, gp41. Метод ИФА выявляет антиген р24, антитела типа 1, 2. Два метода одновременно снижают процент ошибки до 0,1%.

Что делать, если анализ положительный?

При сомнительном результате проводится ПЦР. Он позволяет определить присутствие антител в крови, их концентрацию в пробе. Если повторное тестирование подтвердит факт инфицирования, необходимо начинать поддерживающую терапию, сохраняющую качество жизни больного.

Через полгода делается повторное исследование мочи, слюны, крови. Если результат по-прежнему положительный, необходимо продолжать лечение, соблюдать рекомендации врача. Человек возлагает на себя добровольные обязательства по сохранению мер безопасности, чтобы не стать распространителем возбудителя. Необходимо соблюдать сроки, когда сдавать кровь на очередное исследование.

Ложноположительный и ложноотрицательный результат при исследовании

Анализы на ВИЧ и гепатит В, С придется проходить повторно при ложных результатах. Основные причины ложноположительных оценок:

  • беременность, в 23% случаев плод воспринимается организмом как чужеродный объект;
  • гормональные изменения при приеме противозачаточных препаратов, менструация;
  • недавние прививки;
  • донорство;
  • склеротические поражения;
  • заболевания легких (туберкулез, саркома);
  • печеночные патологии;
  • раковые образования;
  • герпес;
  • лихорадочное состояние.

В этих случаях не стоит паниковать, необходимо повторно обследоваться.

Источник: https://appteka.ru/analizy/analiz-na-vich

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.